茚三酮反应的实际应用例子 蛋白质和甘氨酸与茚三酮的反应?

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茚三酮反应的实际应用例子

蛋白质和甘氨酸与茚三酮的反应?

蛋白质和甘氨酸与茚三酮的反应?

甘氨酸是α-氨基酸,α-氨基酸能与茚三酮反应生成蓝紫色物质。

茚三酮反应的优缺点?

优点:茚三酮与氨基酸中氨基反应形成蓝色至紫红色的物质,但蛋白质或者多肽中也含有氨基残基,也会和茚三酮反应,也会生成有色的物质,比色过程中也会有吸收。因此该方法测定游离氨基酸含量与真实值相比其结果是偏高的。
缺点:用茚三酮比色法测定游离氨基酸含量与真实值相比其结果是偏高的。

水合茚三酮溶液的配制?

1、水合茚三酮试剂:称取 0.6 g 再结晶的茚三酮置烧杯中,加入 15 mL 正丙醇,搅拌使其溶解。再加入 30 mL 正丁醇及 60 mL 乙二醇,最后加入 9 mL pH5.4 的乙酸–乙酸钠缓冲液,混匀,贮于棕色瓶,置 4 ℃下保存备用, 10 d 内有效。
2、称茚三酮1g于35mL热水中溶解,加40mg SnCl2 .H2O(氯化亚锡),搅拌过滤(作防腐剂)。滤液置于冷暗处过夜,加水至50mL,摇匀备用。

茚三酮检验什么?

这是一种检查指端出汗情况的方法。因汗液中含多种氨基酸,遇茚三酮后变为紫色,应用此法可观察自主神经功能状态。
茚三酮也可以用于蛋白质的氨基酸分析。除去脯氨酸之外的大多数氨基酸,水解之后可与茚三酮反应。水解中某些氨基酸的侧链也会被降解。因此对于那些与茚三酮不反应或者发生其他反应的氨基酸需要另作分析。

茚三酮试剂如何配置?

1,用双蒸水配制0.5mgml-1的标准氨基酸溶液50ml。
2,然后用0.5mgml-1的氨基酸溶液在25ml刻度试管中配置0mgml-1、0.1 mgml-1、0.2 mgml-1、0.3 mgml-1、0.4 mgml-1、0.5mgml-1溶液各1ml,加水补足至4ml。
3,然后加入2%茚三酮(取茚三酮0.1g,溶于25mL热水,加入氯化亚锡40mg后过滤,滤液置冷暗出过夜,定容至50mL)和缓冲液各1ml,摇匀,置沸水浴中加热15min,迅速冷却,定容。
4,静置15min,以试剂空白调零,测定各浓度AA溶液的吸光度值A570nm。