蛋白印迹怎么检测
western原理和步骤？
western原理和步骤？
Western blot（也称为蛋白质免疫印迹）是一种常用于研究中分离和鉴定蛋白质的技术。它利用 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE) 来分离指定样品中包含的各种蛋白质，然后将分离的蛋白质转移到硝酸纤维素或 PVDF 膜上，接下来将膜与对感目标蛋白质的特异抗体一起孵育。
操作步骤：
1.准备样品
1）制冰，准备冰盒。
2）配制细胞裂解液：根据细胞数量确定所需裂解液：50ul/六孔板一孔 。
裂解液配方：100ul碧云天裂解液 1ul蛋白酶抑制剂混合物 1ul PMSF
3）按实验需要准备好细胞：去掉培养基，1×PBS洗3次（去掉培养基中的血清），每个孔（6孔板）加入适量的裂解液。迅速用细胞刮刮下细胞并转移至1.5ml管中，置于冰上20min，振荡混合后，再置冰上10min。
4）12，000g，4℃离心15min，收集上清至另一1.5ml管。
医院能直接做蛋白印迹法检测吗？
医院不能直接做蛋白印迹法检测，只有在初筛实验呈现阳性时候，才会进行检测。如果需要做蛋白印迹法检测，建议直接寻找专门可以做的实验机构，那边是可以直接做的，去之前最好查清该机构是否有具备可以做该检测的合格的资质，注意安全以及卫生。
DNA印迹技术特点？
1。分布的集群性最大的印迹基因群集区为X染色体本身，而最大的印迹基因群集区之一位于小鼠7号染色体末端和人类11p15。5处。一个研究较多的印迹基因群集区位于人类15号染色体上，由于该区与普达-威利综合症和亚斯伯格症候群两种人类遗传疾病有关，因此人们对这一群集区很感兴趣，目前已发现在此群集区至少包括ZNF127、VBE3A、5NRPN、PAR-SN、PAR5、PAR1、NDN(necdin)、IPW、GABRG3、GABRB3、GABRA5和FNZ127等12个印迹基因。
2。DNA复制的不同步性细胞周期中的复制时间常与基因表达水平有关，早复制的基因有活性，但印迹基因并不一定遵循此规则。3。基因表达的时空特异性时间特异性：如小鼠胚胎中的Igf2和Mash2开始为双等位基因表达，但在胚胎形成的后期则表现为母源等位基因表达。
人类印迹基因中Igf2基因的表达也有时间改变。 空间特异性：如小鼠Ins-2基因仅在小鼠胚胎的胚外组织中印迹，但在胰岛细胞中双等位基因均表达在人类，KvLQT1基因在大多数组织中为母源表达，但在心脏中无印迹。
4。基因的保守性人们对小鼠和人类基因组印迹基因研究发现人类和小鼠的印迹基因既有相似又有不同点。至今还没有发现真兽亚纲以外的动物有基因组印迹现象的报道，但有袋类动物的X染色体上有印迹现象，它的失活不是随机的，在胚胎和胚外组织中均为父源X染色体优先失活。
5。印迹基因编码RNA人们发现很多印迹基因根本不编码蛋白质，只编码RNA。这类编码RNA的基因具有一些共同特点:这些基因的第一个和最后一个外显子均大，中间含有多个小的外显子在真兽亚纲动物中两个基因编码的RNA一级结构均很保守，虽然那些保守的核苷分布并不完全一致，但在每个基因中其出现具有周期性。
根据潜在的基-环结构上互补碱基变化方式推测出RNA的二级结构其保守性更加显著。这特点表明印迹基因编码的RNA在进化选择中有一定的生物学活性。