进行western
进行western blot成像是选择CCD还是选择扫描式的呢？
blot成像是选择CCD还是选择扫描式的呢？
这要看您的做的应用，如果是进行化学发光（HRP/ECL）这样长时间曝光的实验，CCD检测器是很好的选择，如果是进行荧光WB，需要高动态范围的检测器，和采集的低背景，扫描式的比较好，成像质量更佳。我们实验室用的是azure sapphire的双模式的成像系统，开机率高，不同应用选择不同的成像方式。
你的成像图如果是胶片的，直接用胶片扫描仪制成电子版就可以，用高分辨扫描仪，2400DPI以上的，设到胶片模式。
wb实验步骤及原理？
Western Blot 实验原理
WB 是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。
Western Blot 分类
根据显色方法主要有以下几种：
放射自显影
底物化学发光 ECL
底物荧光 ECF
底物 DAB 呈色
现在常用的有底物化学发光 ECL 和底物 DAB 呈色，体同水平和实验条件的是用第一种方法，目前发表文章通常是用底物化学发光 ECL。只要买现成的试剂盒就行， 操作也比较简单，原理如下（二抗用 HRP 标记）：反应底物为过氧化物 鲁米诺，如遇到 HRP，即发光，可使胶片曝光，就可洗出条带。
ecl显影液原理？
ECL在化学领域，是一种化学发光试剂。electrochemiluminescence
化学发光试剂，
一般是WesternBlot的最后一步，加入1：1的溶液A和溶液B，覆盖pvdf膜，可以显色来观察实验结果。
原理：
一般使用的发光液A和B分别是鲁米诺和 过氧化氢，在 辣根过氧化物酶（HRP）的催化作用下，鲁米诺与过氧化氢反应生成一种过氧化物，过氧化物不稳定随即分解，形成一种能发光的电子激发中间体，当后者由激发态返回至基态，就会产生荧光。
在发光过程中不需要消耗HRP,HRP只是起催化作用，所以只要HRP没降解失活，是可以重复加发光液的。但HRP作为一种蛋白酶，在室温放置时间过长，是会降解的；同时在发光过程中有什么物质（比如显影液）污染了膜的话,也有可能灭活膜上的HRP。